小鼠脑立体定位注射方法的详细解释

小鼠脑立体定位注射方法的详细解释

: 在进行生物学研究时,有时需要在小鼠脑内进行注射。为了实现这一目标,我们需要了解如何正确地进行脑立体定位注射。本文将对小鼠脑立体定位注射方法进行详细的介绍,包括如何确定注射部位以及如何进行实际操作。

首先,我们需要了解小鼠脑部的一些基本结构,特别是侧脑室和海马区域的位置。这些区域的注射在许多研究中都非常常见。在文章的末尾,我们可以找到一张详细的小鼠脑解剖图谱供您参考。

侧脑室的位置相对容易识别,如图所示,其最佳注射点在Interaural(耳间)3.58 mm—3.22 mm,Bregma(前卤)-0.22 mm-- -0.58 mm之间。最佳注射位置为 X= 1.00 mm Z= 1.5 mm Lateral(横向距离),0.60 mm-2.16 mm,最佳位置为0.80 mm Y= 0.80 mm。而海马区域的最佳注射位置则为Interaural(2.58 mm—1.50 mm),Bregma(-1.22 mm-- -2.30 mm),前卤(Bregma)的海马区域最佳位置为X=1.5 mm, Y= 2.0 mm, Z=2.0 mm。

在进行脑立体定位注射之前,我们需要使用一些外部标志(如前囟、后囟、外耳道、眼眶、矢状缝等)或其他参考点进行三维坐标系统的设定,以此来确定皮层下某些神经核团结构的位置。具体操作步骤如下:

1. 首先,通过某些颅骨外面的标志(如前囟、后囟、外耳道、眼眶、矢状缝等)或其他参考点所规定的三维坐标系统,来确定皮层下某些神经核团结构的位置。例如,大鼠固定完成的标准为鼻对正中,头部不动,提尾不掉,目测大脑放置水平(使颅骨水平)。

2. 接下来,我们需要在前囟点,也就是Bregma点,作为颅骨三维坐标系统原点O。然后,根据Bregma点的定位过程,选择脑部靠中间的位置。剪除大鼠顶被毛后,用碘酒或酒精消毒,纵向切开头皮,用止血钳将皮肤左右分开,用刀片刮去颅盖骨膜,或用双氧水腐蚀头盖骨膜,彻底去除骨膜后让Bregma点显现出来。然后用脑定位仪读取Bregma点数值作为三维坐标原点O。

3. 最后,我们通过侧脑室位置的定位,以眼间连线的中点为起点,垂直于眼间连线后移3-4 mm,然后侧移1.1 mm左右,向下3 mm左右,即进入侧脑室。具体的位置依据小鼠的脑大小确定,坐标值,即ML值(X轴)、AP值(Y轴)、DV值(Z轴)。侧脑室位置为前囟点旁开1.5 mm,向后囟方向1.1 mm,深2.0 mm(坐标即为±1.5,-1.1,-4.5)。调整X轴(1.5个单位)及Y轴(1.1个单位)旋钮移动操作臂到坐标位置即可。

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